Получение штаммов — продуцентов аминокислот, приспособленных к наибольшим концентрациям 2Н2О в среде
Получение штаммов — продуцентов аминокислот, приспособленных к наибольшим концентрациям 2Н2О в среде
В рамках данной работы была изучена возможность адаптации разных штаммов метилотрофных микробов, продуцентов аминокислот к росту на средах с наивысшими концентрациями тяжёлой воды. Для этого были испытаны два из имеющихся в коллекции “ГосНИИ Генетики” штаммов метилотрофных микробов: штамм облигатных метилотрофных микробов M. flagellatum, продуцент L-лейцина и штамм факультативных метилотрофных микробов B. methylicum, продуцент L-фенилаланина.
Для проведения адаптации был избран ступенчатый режим роста концентрации 2Н2О в ростовых средах, потому что мы представили, что постепенное привыкание организма к 2Н2О будет оказывать подходящий эффект на адаптацию. Этапы адаптации метилотрофных микробов к средам, содержащим наибольшие концентрации 2Н2О показаны на рис. 1 и схеме. Но вопреки нашим ожиданиям, штамм облигатных метилотрофных микробов M. flagellatum нашел завышенную чувствительность к тяжёлой воде (ингибирование роста микробов наблюдалось при концентрациях 2Н2О в среде 74,5 об.%) [3]. Последующие опыты по адаптации с данным штаммом метилотрофных микробов не проводились. В связи с этим в наших опытах по исследованию уровней включения дейтерия в аминокислоты использовались препараты культуральной воды и биомасса M. flagellatum, приобретенная со среды, содержащей 74,5 об.% 2Н2О и 1 об.% С2Н3О2Н.
Преждевременное нами был описан способ адаптации штамма факультативных метилотрофных микробов B. methylicum к росту при сохранении возможности к биосинтезу фенилаланина на очень дейтерированной среде [7]. В данной работе были изучены эталоны биомассы штамма B. Methylicum (рис.1), приобретенные в процессе многоступенчатой адаптации его к тяжёлой воде на средах с разным содержанием 2Н2О (от 0; 24,5; 49,0; 74,5; об% до 98 об% 2Н2О). Так как данный штамм метилотрофных микробов удалось адаптировать к наибольшим концентрациям 2Н2О в ростовой среде, исследование уровней включения дейтерия в аминокислоты суммарных белков биомассы представлялось более увлекательным.
Схема
Адаптация метилотрофных микробов к средам, содержащим наибольшие концентрации 2Н2О и получения 2Н-и 13С-аминокислот.